1、培養基配方：

（1）I號：PDA(馬鈴薯200g+葡萄糖18g+瓊脂18g+水1000m1)；

（2）Ⅱ號：PDA+硫酸鎂1.5g+磷酸二氫鉀3g+蛋白胨2g+水1000ml；

（3）Ⅲ號：馬鈴薯100g+干雜木屑100g+葡萄糖20g+瓊脂20g+水1000ml。

（4）注意：上述配方的培養基經高壓20分鐘滅菌消毒后制成試管斜面，3天內用完。

2、制作方法：

通過組織分離技術，將選取的大球蓋菇組織塊接入I號培養基上(或接入需復壯的保存種)。在24--28℃條件下經10--15天培養,菌絲長至試管1/3--1/4時,挑取菌絲擴展前端濃密、粗壯的部分轉入Ⅱ號或Ⅲ號培養基上，采用兩點接種法，以使菌絲迅速長滿培養基表面(一般15--20天)提高菌絲的質量。經Ⅱ號、Ⅲ號復壯培養基培養的菌絲表現為濃白、粗壯、生命力強，以利原種菌絲的生長，縮短原種培養時間，提高成品率。